文献类型：期刊文章

作　　者：冯怡[1] 崔立斌[2] 刘传暄[1] 马清钧[1]

机构地区：[1]北京生物工程研究所,maryland20742 [2]University of Maryland, Nutrition and food science department, College Park,,北京100850

出　　处：《生物工程学报》

年　　份：2001

卷　　号：17

期　　号：3

起止页码：278-282

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2000、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：内皮抑素 (Endostatin)是近年来新发现的一种内源性新生血管生成 (Angiogenesis)抑制因子 ,通过抑制新血管生成而抑制肿瘤的形成和转移且不会引起耐药性 ,具有极高的临床应用前景。巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)具有表达率高、产物可分泌、可对高等真核生物蛋白正确进行翻译后加工、遗传稳定、发酵工艺成熟等优点被用来进行重组人Endostatin的表达。本研究用PCR的方法从人胎肝cDNA文库中扩增出人Endostatin的cDNA ,测序正确后转入毕赤巴斯德甲醇酵母 ,并获得了高效可溶型表达 ,用肝素亲和层析的方法进行纯化 ,纯化后产物经SDS PAGE薄层扫描分析纯度达 98 7%以上 ,质谱测定分子量为 2 0 43kD与理论值一致 ,蛋白质N端序列测定结果为SPPAHTHRDFQPVLH与天然序列一致。生物活性检测证明可抑制鸡胚尿囊绒毛膜 (CAM)的新生血管生成 (Angio genesis) ,并可抑制血管内皮细胞的增殖。因此用酵母表达系统可以得到具有生物活性的内皮抑素 。

关 键 词：内皮抑素 毕赤巴斯德酵母  新生血管生成 表达  生物功能

分 类 号：Q786]