文献类型：期刊文章

作　　者：贝锦龙[1] 陈庄[2] 杨林[1] 廖玲[2] 王珣章[1] 蒋宗勇[2]

机构地区：[1]中山大学生物防治国家重点实验室生物医药中心,广州510275 [2]广东省农业科学院畜牧研究所,广州510650

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：广东省自然科学基金! ( 990 5 0 8) ;广东省重点科技项目! ( 2KM0 2 5 0 5G)&&

年　　份：2001

卷　　号：17

期　　号：3

起止页码：254-258

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2000、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：本文以黑曲霉 (Aspergillusniger)NRRL3135菌株植酸酶基因为对象 ,通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列 ,换用在毕赤酵母 (Pichiapastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因 (PhyA as)以N端融合的方式正确插入到毕赤酵母表达载体pPICZαA。通过电击将重组表达载体整合入酵母染色体DNA中得到重组转化子。SDS PAGE结果与表达产物酶学性质研究表明植酸酶得到分泌表达 ,且与天然产物性质基本一致。筛选得若干株高产基因工程菌 ,其中SPAN Ⅲ菌株达到了在摇床培养条件下 ,每毫升发酵液产生 16 5 0 0 0u植酸酶的水平 。

关 键 词：基因人工合成  植酸酶基因 phyA-as  毕赤酵母表达系统

分 类 号：Q786]