文献类型：期刊文章

作　　者：赵超悦[1] 宋润敏[2] 秦晖[2] 王娜[2] 杨柳[1] 李江[1]

机构地区：[1]吉林大学口腔医院口腔修复科,吉林长春130021 [2]东北师范大学生命科学学院膜通道实验室,吉林长春130024

出　　处：《吉林大学学报（医学版）》

基　　金：吉林省科技厅科技发展计划项目资助课题(YYZX201241);吉林省科技厅自然科学基金资助课题(201115106);吉林省长春市科技局科研基金资助课题(2011122)

年　　份：2014

卷　　号：40

期　　号：3

起止页码：583-587

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的:构建细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)糖基化位点突变质粒,探讨其与肿瘤细胞增殖的关系。方法:利用PCR定点诱变技术构建EMMPRIN糖基化位点突变质粒。突变成功后,对突变质粒进行功能检测,Western blotting法检测EMMPRIN蛋白表达;免疫荧光法检测细胞形态学变化;MTT法检测突变质粒与肿瘤细胞增殖的关系。结果:酶切鉴定和测序证实,将EMMPRIN序列中第44、152和186位的天冬酰胺突变成谷氨酰胺,成功构建EMMPRIN/GFP(N44Q)、EMMPRIN/GFP(N152Q)和EMMPRIN/GFP(N186Q)糖基化单点突变质粒;糖基化位点突变后,突变型细胞核分裂相显著减少,伪足数减少;MTT法检测,与对照组比较,野生型组细胞存活率明显升高(P<0.05);而EMMPRIN糖基化位点突变后,与野生型比较,EMMPRIN(N44Q)、EMMPRIN(N152Q)和EMMPRIN(N186Q)细胞存活率均明显降低(P<0.05)。结论:EMMPRIN突变型能抑制肿瘤细胞的增殖,且随作用时间增加,抑制作用减弱;EMMPRIN糖基化修饰与肿瘤细胞的增殖有关联。

关 键 词：细胞外基质金属蛋白酶诱导因子 点突变 糖基化 细胞增殖

分 类 号：Q78]