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抗有机磷农药单链抗体cDNA文库的构建与鉴定
Construction and Identification of cDNA Library of Single Chain Fragment against Organophosphorus Pesticides
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]重庆科技学院化学化工学院,重庆401331 [2]重庆大学城市建设与环境工程学院,重庆400045
基 金:教育部博士点基金项目(20090191110031)
年 份:2014
卷 号:43
期 号:5
起止页码:97-101
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2011、CAB、CSCD、CSCD_E2013_2014、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:为了获得针对不同有机磷农药的单链抗体,以人工合成的2种有机磷农药(杀螟硫磷和毒死蜱)抗原免疫小鼠,测定抗血清效价后,提取小鼠脾细胞总RNA,设计引物,通过RT-PCR扩增得到片段大小分别约为400bp和700bp的小鼠重链、轻链可变区基因,再利用融合PCR连接重链、轻链可变区,构建抗有机磷的单链抗体cDNA文库,片段约为1 100bp。将构建的cDNA文库与pMD18-T载体连接并转化大肠杆菌DH5α,测序分析表明,所构建的文库片段互补决定区序列变化明显,多样性好,为进一步筛选抗有机磷的高特异性、高亲和力单链抗体奠定了基础。
关 键 词:有机磷农药 抗原 单链抗体 CDNA文库
分 类 号:S482.33]
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