文献类型：期刊文章

作　　者：黄秀梅[1] 叶子坚[1] 李鹤宾[1]

机构地区：[1]厦门医学高等专科学校药学系,福建厦门361008

出　　处：《江西农业大学学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(31201969);厦门市科技计划项目(3502Z20093041)

年　　份：2014

卷　　号：36

期　　号：2

起止页码：418-421

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2013_2014、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：克隆人胰岛素原基因,通过密码子优化和融合蛋白化学水解位点和纯化标签优化,构建人胰岛素原高效原核表达系统,为重组人胰岛素原的高效表达纯化制备奠定基础。根据大肠杆菌密码子偏好性优化设计人胰岛素原基因,通过PCR技术获得重组基因,构建原核表达载体pET-32a-proinsulin,转化大肠杆菌表达株E.coli BL21,筛选人胰岛素原高效表达菌株,建立诱导表达和纯化融合蛋白技术方法。克隆获得优化的人胰岛素原重组基因,构建原核高效表达载体,获得优化的诱导表达方法和纯化的人胰岛素原。该研究为建立胰岛素高效制备的优化条件奠定基础。

关 键 词：人胰岛素原 蛋白表达 基因重组 pET-32a  

分 类 号：Q578]