文献类型：期刊文章

作　　者：李菁华[1] 史红艳[1] 韩放[1] 逯茵茵[1] 徐国全[2] 于丽[2] 孙延波[1]

机构地区：[1]吉林大学白求恩医学部基础医学院病原生物学系,吉林长春130021 [2]大庆市红岗区人民医院,黑龙江大庆163000

出　　处：《微生物学免疫学进展》

基　　金：吉林省科技厅资助课题(吉林省科技发展计划项目:应用基础200705374)

年　　份：2014

卷　　号：42

期　　号：2

起止页码：7-11

语　　种：中文

收录情况：JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7基因密码子优化后的原核表达系统,通过特异性抗体制备评价E7融合蛋白的免疫原性。方法人工合成优化后的HPV16 E7基因,利用特异引物扩增HPV16 E7基因。将E7基因连接至原核表达载体构建重组表达质粒pMAl-c2X-E7,转化至感受态细胞DE3后,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表达产物E7融合蛋白。纯化后的E7融合蛋白免疫动物,采用ELISA检测动物血清效价。结果 E7基因PCR产物的测序结果与优化后的目的基因序列比对一致。表达的E7融合蛋白经SDS-PAGE分析表明:在相对分子质量50 000处有特异性表达带,与预期相符。以E7融合蛋白制备的多克隆抗体其血清效价可达1∶64 000。结论成功构建的重组表达质粒pMAl-c2X-E7可有效表达MBP-E7融合蛋白,E7融合蛋白具有良好的免疫原性。

关 键 词：人乳头瘤病毒16型 原核表达 多克隆抗体

分 类 号：R392] R737.33[基础医学类]