期刊文章详细信息
mTSLP-V1/V2融合蛋白的真核表达与鉴定
Eukaryotic expression and characterization of mouse TSLP and HIV-1 gp120BAL V1/V2 fusion protein
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]南京大学医学院公共健康医学中心,南京210093 [2]南京医科大学附属第二医院,南京210011
基 金:国家自然科学基金面上项目(No.30870124);科技部国际合作项目(No.2009DFA31260)的资助
年 份:2014
卷 号:30
期 号:5
起止页码:582-586
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2011、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2013_2014、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的:将鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(mouse thymic stromal lymphopoietin,mTSLP)与人免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)B亚型分离株BAL的gp120 V1/V2结构域在293F真核细胞表达体系中进行融合表达。方法:以真核表达质粒pCEP-Pu为载体,构建mTSLP与gp120BALV1V2融合基因的重组蛋白表达质粒pCTV1V2BAL。限制性酶切电泳与测序验证质粒构建正确后,使用PEI瞬时转染293F悬浮细胞,表达产物以SDS-PAGE与Western blot进行分析,并对纯化后重组蛋白的V1/V2抗原表位进行了ELISA分析。结果:SDS-PAGE、Western blot分析显示,在表观分子量35 kD至55 kD的范围内存在一条不均一的糖蛋白条带,并且能与抗mTSLP多克隆抗体和抗His标签单克隆抗体发生反应。HIV-1阳性病人血清能够识别mTSLP-V1/V2BAL上的HIV-1V1/V2抗原表位。结论:在293F中成功表达了mTSLP-V1/V2BAL融合蛋白,该蛋白具有HIV-1gp120BALV1/V2区的抗原表位,能够用于HIV-1 gp120 V1/V2亚单位疫苗的研究。
关 键 词:人免疫缺陷病毒1型 gp120可变区1 2 鼠胸腺基质淋巴细胞生成素 293 F表达体系 融合蛋白
分 类 号:R392.11]
参考文献:
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