文献类型：期刊文章

作　　者：王候光[1] 马苗鹏[2] 黄魁英[3] 李华周[1] 明飞平[3] 王伟芳[1] 夏枫耿[3] 罗梦晓[2] 杨军[2] 蔡海明[2] 施巨清[2] 黄朝远[2] 楚品品[2] 董建明[1] 朱红霞[1] 张玲华[2]

机构地区：[1]广州市良种猪场,广东广州510540 [2]华南农业大学生命科学学院,广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室,广东广州510642 [3]广州市微生物研究所,广东广州510663

出　　处：《中国畜牧兽医》

基　　金：广州市科技攻关项目(201300000040);广州市科技攻关项目(2014Z1)

年　　份：2014

卷　　号：41

期　　号：5

起止页码：53-57

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：本试验旨在原核表达猪去乙酰化酶SIRT3,并初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性。采用RT-PCR扩增包含SIRT3的完整编码序列;通过Ω-PCR,将SIRT3完整编码序列克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,转入大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行诱导表达和亲和层析纯化;经免疫印迹分析初步评价SIRT3的抗原性和特异性。重组原核表达质粒pET28aSIRT3经双酶切及测序鉴定证明构建正确,表达的重组蛋白相对分子质量约39ku,能被相关抗体识别。结果表明,本试验成功在大肠杆菌中表达猪去乙酰化酶SIRT3,为对其进行进一步研究奠定了基础。

关 键 词：猪  SIRT3  原核表达

分 类 号：Q75]