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朱黄青霉α-1,6-葡聚糖酶在毕赤酵母GS115中的异源表达
Heteroexpression of α-1,6-Dextranase from Penicillium minioluteum in Pichia pastoris
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]华东理工大学鲁华生物技术研究所,上海200237 [2]宁夏夏盛实业集团有限公司,上海200237
年 份:2014
卷 号:16
期 号:2
起止页码:77-80
语 种:中文
收录情况:CAB、CAS、CSA-PROQEUST、IC、ZGKJHX、普通刊
摘 要:目的构建毕赤酵母基因工程菌,以实现朱黄青霉α-1,6-葡聚糖酶的异源高效表达。方法人工合成朱黄青霉HI-4的α-1,6-葡聚糖酶基因ZHdex,克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K,电转入毕赤酵母GS115。甲醇诱导目的蛋白表达。结果成功在毕赤酵母GS115中对ZHdex基因进行表达,SDS-PAGE表明重组毕赤酵母在66×103附近有目的蛋白表达,与理论值一致。在摇瓶水平,甲醇诱导培养120 h后,α-1,6-葡聚糖酶的最高酶活达28.79 U/mL,蛋白质浓度为0.56 mg/mL。结论获得一株重组毕赤酵母GS115-ZHdex,其产物具备α-1,6-葡聚糖酶活性,成功地实现朱黄青霉α-1,6-葡聚糖酶的异源高效表达。
关 键 词:朱黄青霉 α-1,6-葡聚糖酶 异源表达 毕赤酵母
分 类 号:R969]
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