文献类型：期刊文章

作　　者：马元武[1] 马婧[1] 路迎冬[1] 陈炜[1] 张旭[1] 于磊[1] 张连峰[1]

机构地区：[1]中国医学科学院,北京协和医学院,医学实验动物研究所,卫生部人类疾病比较医学重点实验室,北京100021

出　　处：《中国比较医学杂志》

基　　金：国家科技支撑计划课题(2012BA139B02)

年　　份：2014

卷　　号：24

期　　号：3

起止页码：55-60

语　　种：中文

收录情况：CAS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的为研究胰岛素受体底物1(Irs1)基因与代谢病之间的关系,我们利用CRISPR/Cas9系统敲除大鼠Irs1基因,为研究代谢病提供基因敲除大鼠。方法针对Irs1第一外显子,设计CRISPR/Cas9作用靶点,构建sgRNA表达质粒。利用T7 RNA聚合酶体外转录sgRNA和Cas9。将Cas9 mRNA和sgRNA混合物注射入SD大鼠的受精卵中,实现靶基因敲除。用T7EN1实验初步检测靶基因的修饰情况,再经过测序分析确定突变。结果获得了5个在Irs1基因突变的首建鼠,突变效率为83%。结论得到了稳定遗传的Irs1基因敲除大鼠。

关 键 词：Irs1  基因敲除 大鼠  CRISPR Cas9  

分 类 号：R332]