文献类型：期刊文章

作　　者：肖元元[1] 韩峻峰[1] 毛月芹[1] 王倩倩[1] 魏美林[1] 殷峻[1] 黄金伟[2] 魏丽[1]

机构地区：[1]上海交通大学医学院附属第六人民医院内分泌代谢科上海市糖尿病研究所,200233 [2]上海交通大学无锡研究院

出　　处：《中华诊断学电子杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81370956);上海交通大学无锡研究院交大专项资金(2011JDZX021)

年　　份：2014

卷　　号：2

期　　号：1

起止页码：26-30

语　　种：中文

收录情况：JST、普通刊

摘　　要：目的研究过表达内质网应激相关蛋白1(SERP1)对衣霉素诱导肝癌Hep G2细胞内质网应激的影响。方法以衣霉素诱导Hep G2细胞发生内质网应激,将细胞分为以下5组:正常对照组、衣霉素组、衣霉素+0.25μg SERP1转染组、衣霉素+0.5μg SERP1转染组和衣霉素+1.0μg SERP1转染组,每组实验重复3次;采用MTT法检测不同浓度与作用时间的衣霉素对Hep G2细胞存活率的影响,以吸光度(A)值表示。Western blot法检测各组细胞内内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)以及钙联蛋白的表达水平。采用SPSS 15.0统计软件进行统计学分析,比较蛋白表达水平。结果与对照组相比,衣霉素处理组Hep G2细胞中内质网应激标志性蛋白GRP78、CHOP及Calnexin蛋白表达量显著升高,分别为对照处理组的3.8倍(t=11.5,P<0.05)、1.3倍(t=3.498,P<0.05)和1.4倍(t=4.1,P<0.05),差异均有统计学意义;随着SERP1过表达量的逐渐升高,变化呈现剂量依赖性。随着SERP1转染剂量的增加,各组GRP78蛋白的表达较单独衣霉素处理组分别下降了12%[(1.83±0.29)A值,(1.61±0.13)A值,t=2.36,P>0.05]、24%和30%[(1.83±0.29)A值,(1.40±0.11)A值,(1.27±0.21)A值;F=50.56,P<0.05],CHOP蛋白的表达水平分别下降了23%,29%和34%[(1.0±0.15)A值,(0.79±0.07)A值,(0.72±0.55)A值,(0.67±0.14)A值;F=9.532,P<0.05],Calnexin蛋白的表达水平分别下降了5%[(1.20±0.18)A值,(1.15±0.13)A值;P>0.05]、24%和28%[(1.20±0.18)A值,(0.92±0.07)A值,(0.87±0.18)A值;F=8.116,P<0.05]。结论外源性过表达SERP1蛋白通过下调内质网应激蛋白的表达,降低Hep G2细胞内质网应激水平,缓解内质网应激介导的细胞损伤。

关 键 词：内质网应激 内质网应激相关蛋白1  葡萄糖调节蛋白78  C  EBP同源蛋白  钙联蛋白  Stress-associated  Endoplasmic  Reticulum  PROTEIN 1  Glucose-regulated  PROTEIN 78  

分 类 号：R363]