文献类型：期刊文章

作　　者：李宁[1] 吉晓滨[1] 谢景华[1] 刘启才[2]

机构地区：[1]广州市第一人民医院耳鼻咽喉科,510180 [2]广州医科大学实验医学研究中心

出　　处：《中华临床医师杂志（电子版）》

基　　金：广东省科技厅产业技术研究与开发资金计划项目(2012B031800340);广州市科技和信息化局社会发展应用基础研究专项(2013J4100024)

年　　份：2014

卷　　号：8

期　　号：1

起止页码：86-90

语　　种：中文

收录情况：CAS、IC、JST、RCCSE、普通刊

摘　　要：目的检测真核质粒pMAGEA3-IRES-SEA经过电穿孔转染在小鼠中的转录。方法将葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal endotoxin A,SEA)和喉癌来源的黑色素瘤抗原A3(melanomaassociated antigen A3,MAGE-A3),构建成基因共表达的真核质粒pMAGEA3-IRES-SEA。将pMAGEA3-IRES-SEA用电转染的方法免疫BALB/C小鼠单侧股四头肌,每2周1次,每次注射50μg,共免疫3次。末次免疫2周后,取注射部位组织,用荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测目的基因在注射部位肌肉中的转录情况。结果在实验小鼠注射部位的骨骼肌内检测到SEA、MAGE-A3基因转录mRNA。结论所构建的pMAGEA3-IRES-SEA真核表达质粒,可通过电转染的方式,在小鼠体内能有效地转录。这为研究该质粒通过小鼠的体内转录蛋白的表达,诱导机体细胞免疫、体液免疫来清除喉癌,奠定了理论基础。

关 键 词：葡萄球菌属 超抗原 黑色素瘤  电穿孔 喉肿瘤  电转染

分 类 号：R739.65]