文献类型：期刊文章

作　　者：李朝晖[1] 田男[2] 付红[1] 李妍哲[1] 韩亮[1] 田宇[1]

机构地区：[1]吉林大学白求恩医学部中日联谊医院神经外二科,长春市130031 [2]浙江中医药大学生命科学学院

出　　处：《中国肿瘤临床》

基　　金：国家自然科学基金(编号:30672159);教育部"新世纪优秀人才支持计划"(编号:NCET-06-0306);吉林省科技发展计划国际科技合作项目(编号:20130413028GH)资助~~

年　　份：2014

卷　　号：41

期　　号：6

起止页码：359-362

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:探讨Bcl-x mRNA前体剪接转换寡核苷酸(Bcl-x splice-switching oligonucleotides,Bcl-x SSO)对胶质瘤细胞株U251增殖和凋亡的影响。方法:设计靶向Bcl-x基因下游选择性5'端剪接位点的Bcl-x SSO,β-globin SSO作为阴性对照SSO。SSO经2'-甲氧乙基(2'-O-methoxyethyl,MOE)、全硫代磷酸化(phosphorothioate,PS)修饰。采用阳离子脂质体将不同的SSO转染至U251细胞。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测Bcl-x SSO对U251细胞的增殖抑制率。流式细胞术定量检测U251细胞的凋亡率。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Bcl-x SSO对Bcl-xL、Bcl-xS mRNA表达水平的影响,Western blot方法检测Bcl-x SSO对Bcl-xL、Bcl-xS蛋白表达的影响。结果:MTT结果显示Bcl-x SSO显著抑制U251细胞的增殖,且抑制作用呈剂量依赖性。流式细胞术检测Bcl-x SSO能够明显促进U251细胞凋亡。RT-PCR检测Bcl-x SSO处理组Bcl-xL mRNA表达水平下降,Bcl-xS mRNA表达水平升高。Western blot检测Bcl-x SSO处理组Bcl-xL蛋白表达水平下降,Bcl-xS蛋白表达水平升高。结论:在胶质瘤细胞U251中,Bcl-x SSO可特异性的作用于Bcl-x mRNA前体,调节其选择性剪接模式从Bcl-xL转换至Bcl-xS,进而促进U251细胞凋亡。

关 键 词：选择性剪接 寡核苷酸 凋亡  流式细胞术 胶质瘤细胞

分 类 号：R739.41]