文献类型：期刊文章

作　　者：王婵[1] 戴应[1] 郭永龙[1] 杨艳[2] 刘庆[2] 陈建苏[1,2]

机构地区：[1]暨南大学再生医学教育部重点实验室,广东省广州市510632 [2]暨南大学医学院眼科研究所,广东省广州市510632

出　　处：《中国组织工程研究》

基　　金：国家自然科学基金项目"微重力介导角膜基质细胞的iPS诱导及其角膜内皮细胞分化(30973244)"~~

年　　份：2014

卷　　号：18

期　　号：6

起止页码：872-879

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2013_2014、EMBASE、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：背景:大多哺乳类细胞在正常生理状态下多以三维结构存在,为还原细胞本身在体内的自然状态,很多研究者开始尝试在体外对细胞进行三维培养,球形培养是一种常见的三维培养模式。目的:尝试用3种不同的方法在体外对人脂肪干细胞进行球形培养,并观察其生物学特征。方法:对提取的脂肪来源细胞进行表面Marker流式检测以及成脂成骨诱导鉴定后,证实为脂肪干细胞。先后用低黏附培养法、hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法3种方法在体外对脂肪干细胞进行球形培养,对3种方法形成球形的特点进行比较分析,并通过Imagej软件计算出3组多细胞球体的平均面积,利用Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Live&Dead Cells试剂盒对3组多细胞球体进行活力检测。结果与结论:①通过流式细胞术鉴定细胞表型标志物,其中CD29,CD44,CD59完全阳性,同时成脂成骨诱导也为阳性,证实提取的细胞为脂肪干细胞。3代以内脂肪干细胞多呈长梭形,并克隆状生长。②低黏附培养法、hanging-drop培养法、Eppendorf管培养法均可使脂肪干细胞聚集成球形生长,但所成多细胞球形有所差异。低黏附培养法所形成的细胞球形大小不一,不易控制;而hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法均可使脂肪干细胞形成大小均一的球形,但在大小和形成时间上有所不同。③3种不同方法所形成的球形细胞均保持较好的细胞活力。

关 键 词：干细胞 脂肪干细胞 诱导分化 球形培养  活力  低黏附培养  hanging-drop培养  Eppendorf管培养  国家自然科学基金

分 类 号：R394.2]