文献类型：期刊文章

作　　者：王琪炜[1] 陈宝俊[2] 强倩[1] 李淑锋[3]

机构地区：[1]东南大学生命科学研究院,江苏南京210018 [2]南京大学医学院附属鼓楼医院心胸外科,江苏南京210008 [3]东南大学医学院生物化学与分子生物学系,江苏南京210009

出　　处：《东南大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金面上项目(31070706)

年　　份：2014

卷　　号：33

期　　号：1

起止页码：1-4

语　　种：中文

收录情况：CAS、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:在大肠杆菌中表达人源转录因子sp1蛋白,并进行体外纯化。方法:首先将人源sp1真核表达质粒pCMV-sp1中的sp1 cDNA用限制性内切酶切开,连入原核表达质粒pET28b,构建原核表达重组质粒pET28b-sp1-699c;然后将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达带His-Tag的融合蛋白His-sp1(88-786aa),通过包涵体的变复性和Ni-IDA亲和层析纯化后,SDS-PAGE鉴定纯化后的蛋白。结果:融合蛋白His-sp1在大肠杆菌内得到高效表达,纯化后可得到较高纯度的蛋白。结论:本研究获得了较高纯度的融合蛋白His-sp1,为进一步研究sp1蛋白对靶基因的转录调控奠定了基础。

关 键 词：sp1蛋白  转录因子 大肠杆菌 蛋白表达与纯化  

分 类 号：Q876[生物科学类]