文献类型：期刊文章

作　　者：金云云[1] 剡根强[1] 王静梅[1] 王超丽[1] 马玉英[2]

机构地区：[1]石河子大学动物科技学院,新疆石河子832003 [2]新疆石河子工程技术学校,新疆石河子832000

出　　处：《畜牧与兽医》

基　　金：国家科技支撑计划课题(2012BAD43B02);石河子市农业科技攻关计划(2011NY10)

年　　份：2014

卷　　号：46

期　　号：2

起止页码：10-14

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以牛支原体(Mycoplasma bovis)全菌蛋白经超声波裂解后的裂解物作为包被用抗原,建立检测牛支原体血清抗体的间接ELISA方法。通过棋盘滴定法确定抗原最适包被浓度、待检血清最佳稀释度,同时对抗原的包被方式、封闭剂和封闭时间、酶标二抗最佳工作浓度、一抗和二抗最佳作用时间、血清稀释液、底物显色时间进行优化。用该方法测定10份阴性血清的OD450值计算出阴性临界值,并对牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清进行检测。结果:抗原最适包被浓度为200μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶100,阴性临界值为0.327。用该方法检测牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清均无交叉反应,表明该间接ELISA具有很好的特异性。

关 键 词：间接ELISA 牛支原体 抗体

分 类 号：S852.62]