文献类型：期刊文章

作　　者：张秀芬[1] 谢可鸣[1] 邹健[2] 李玉玲[1] 穆会君[2] 张滨[2] 谢平[2]

机构地区：[1]苏州大学医学部病理生理学教研室,江苏215123 [2]无锡市人民医院中心实验室

出　　处：《中华医学遗传学杂志》

年　　份：2014

卷　　号：31

期　　号：1

起止页码：34-38

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、JST、PUBMED、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨在自血病耐药细胞K562／A02中核因子κB（nuclear transcription factor-kappaB,NF-κB）是否参与葡萄糖神经酰胺合成酶（glucosylceramide synthase, GCS）对P-糖蛋白（P-glycoprotein, P-gp）的调节作用，并研究在该调节作用信号通路中NF-κB出与细胞外信号调节激酶（ extracelluar signal-regulated kinase, ERK）的相互关系。方法应用特异性的GCS小干扰RNA（multidrug resistance protein 1, MDR1） mRNA抑制GCS基因后，实时荧光定量PCR方法检测靶基因抑制率以及对多药耐药蛋白1（multidrug resistance protein 1, MDR1）mRNA表达水平的影响；同时应用Western印迹检测各种蛋白的表达情况。使用NF-κB的特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC）抑制NF-κB后，应用Western印迹检测P—gP的表达情况。U0126抑制P-ERK（phosphorylated-ERK）后，Western印迹检测细胞核内以及总的NF_KBp65和P—gP的表达。结果GCSsiRNA转染48h后，GCSmRNA的表达被抑制，抑制率为62％（51％～73％），同时下调MDRlmRNA的表达，抑制率为52％（43％～61％），与阴性干扰对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；GCSsiRNA转染72h后，GCSsiRNA组细胞核内NF-eBp65及P—ERK的表达水平均明显下调（P〈0．05），同时对P～gP的表达亦有显著的抑制作用（P〈0．05）。NF-κB的抑制剂PDTC处理K562／A02细胞后，对P—gP有明显的抑制作用（P〈0．05）。P—ERK抑制剂U0126处理K562／A02细胞，除了能显著抑制PERK1／2的表达外（P〈0．01），还可明显抑制细胞核内NF-κBp65的表达和P—gP的表达（P〈0．01）。结论NF-κB介导了白血病多药耐药细胞中GCS对P—gp的调节作用，且在这一调节作用信号通路中位于ERK下游。

关 键 词：葡萄糖神经酰胺合成酶 P-糖蛋白 核因子κB  细胞外信号调节激酶1 2  多药耐药

分 类 号：R733.7]