文献类型：期刊文章

作　　者：刘莉[1] 肖招燕[1] 郭丽琼[1,2] 林俊芳[1,2] 尤琳烽[1] 廖静文[1]

机构地区：[1]华南农业大学食品学院,广东广州510640 [2]华南农业大学生物质能研究所,广东广州510640

出　　处：《菌物学报》

基　　金：国家自然科学基金(No.31071837;No.31272217)"食用真菌组合表达紫杉醇及其中间产物的基础研究"和"食用真菌组合表达白藜芦醇的研究"

年　　份：2014

卷　　号：33

期　　号：1

起止页码：121-128

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2013_2014、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：对猴头菌Hericium erinaceus原生质体制备的各种因素进行比较研究,结果表明,猴头菌原生质体制备的最佳体系为:液体培养5d的猴头菌丝,以0.6mol/L KCl作为稳渗剂,加入含1.0%纤维素酶+1.0%蜗牛酶+1.0%溶壁酶的复合酶,在30℃酶解猴头菌丝3h时,原生质体得率达到3.0×106个/mL。潮霉素敏感性测试表明,猴头菌在PDSA固体培养基上的潮霉素最低筛选浓度为60μg/mL。采用PEG介导的原生质体法,将质粒pBgGI‐hph(含有灵芝gpd1‐Gl启动子和潮霉素抗性基因hph)转化猴头菌原生质体,经潮霉素初步筛选以及PCR鉴定,表明有4株猴头菌拟转化子的基因组扩增出hph基因;转化子经过多次转接后进行Southern杂交验证,结果表明4个转化子的基因组中均稳定整合了hph抗性基因。

关 键 词：猴头菌 原生质体制备 PEG介导转化  

分 类 号：S646]