文献类型：期刊文章

作　　者：马娟[1] 谢良志[1,2]

机构地区：[1]中国医学科学院北京协和医学院细胞工程中心,北京100005 [2]北京义翘神州生物技术有限公司,北京100176

出　　处：《中国医学科学院学报》

基　　金：十二五“重大新药创制”科技重大专项(2011ZX09506-003)~~

年　　份：2013

卷　　号：35

期　　号：6

起止页码：618-622

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建重组人白细胞介素-35[rhIL-35-IgG1(Fc)]蛋白的真核表达载体并表达纯化该蛋白,研究IL-35与其受体糖蛋白130(gp130)的结合作用。方法构建IL-35真核表达载体pSTEP2-IL35-LFc,转染到HEK293T细胞中,采用亲和色谱分离纯化获得重组IL-35蛋白,SDS-PAGE及Western blot法鉴定蛋白表达,ELISA法检测IL-35-Fc与其受体链gp130的结合作用,并在M1小鼠白血病细胞上研究IL-35对gp130的生物学作用。结果获得高纯度的人IL-35-Fc重组蛋白,ELISA法检测结果发现IL-35-Fc与其受体链gp130具有结合作用,并且IL-35在M1小鼠白血病细胞上对gp130具有中和作用。结论成功制备了具有生物活性的人IL-35-IgG1(Fc)重组蛋白,发现IL-35能够与其受体链gp130的结合,在M1小鼠白血病细胞上对gp130也具有中和作用。

关 键 词：重组人白细胞介素-35  糖蛋白130  M1小鼠白血病细胞  

分 类 号：Q78]