文献类型：期刊文章

作　　者：毕薇薇[1,2] 何丽嵘[2] 李超[2] 聂德志[2]

机构地区：[1]四平市中心医院,吉林省四平市136000 [2]吉林省拓华生物科技有限公司,吉林省四平市136000

出　　处：《中国组织工程研究》

年　　份：2013

卷　　号：17

期　　号：49

起止页码：8583-8589

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2013_2014、EMBASE、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：背景:一个胎盘羊膜的面积约600 cm2,羊膜来源间充质干细胞即取材于胎盘上的羊膜。目的:建立一种简单的体外分离培养人羊膜来源间充质干细胞的方法,并分析其生物学特性。方法:采用胰酶和直接贴壁相结合的方法分离获取人羊膜来源间充质干细胞并进行体外培养,观察细胞形态,分析传代第5代细胞生长曲线,检测第5代细胞表面标志表达和检测细胞周期。取传代第4代细胞行体外成骨细胞诱导和成脂诱导,冻存第4代细胞6个月后复苏,计数复苏后细胞存活率并绘制复苏细胞生长曲线。结果与结论:原代接种后第9天有少许细胞爬出,15 d左右细胞达80%-90%融合,细胞以梭形为主。细胞传代后,细胞形态均一,螺旋状排列。传代细胞潜伏期48 h,对数增殖期4 d左右,对数增殖期后进入平台期。间充质干细胞表面CD34、CD14、CD19、CD45、HLA-DR呈阴性表达,CD73、CD105、CD90呈阳性表达。茜素红染色及油红O染色阳性,证实具有向脂肪细胞、成骨细胞分化的能力。流式细胞术细胞周期检测,S期占28%。冻存复苏后细胞存活率达90%以上,且与未冻存传代细胞具有相同的生长特性。结果证实实验成功地建立了一种简化的人羊膜来源间充质干细胞大量扩增的方法。

关 键 词：干细胞 干细胞培养与分化  人羊膜间充质干细胞 羊膜 间充质干细胞 成骨诱导 成脂诱导  茜素红染色  油红O染色  细胞培养  生物学特性  干细胞图片文章  

分 类 号：R394.2]