文献类型：期刊文章

作　　者：郑春阳[1] 刘珺[1] 魏国祥[1] 王磊[1]

机构地区：[1]天津强微特生物科技有限公司,天津300384

出　　处：《食品与生物技术学报》

基　　金：天津市滨海新区科技小巨人成长计划-科技型企业创新发展(科技创业)项目(2010-BK130070);天津市科技型中小企业技术创新基金项目(11C26211203970);天津市滨海新区重大科技项目(2011-BK120014);天津市科技计划项目(12ZCZDSY01800)

年　　份：2013

卷　　号：32

期　　号：12

起止页码：1333-1337

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、FSTA、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：首先根据Thermopolyspora flexuosa的内切-1,4-β-木聚糖酶基因设计了引物,PCR扩增成功后进行酶切消化,连接载体质粒pHT43,经大肠杆菌DH5α扩增后,挑选阳性克隆,经菌体PCR及测序验证后,将基因序列测序正确的质粒大量抽提,经过转化导入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilius WB800N宿主,培养并经过1 mmol/L IPTG诱导表达后,发酵胞外上清经SDS-PAGE电泳证明重组蛋白质成功获得表达。其相对分子质量为27 kD,最适反应温度为80℃,最适反应pH为6.0。由此得知,分泌表达的嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶的枯草芽孢杆菌工程菌株构建成功,这为未来该酶的产业化生产奠定了基础。

关 键 词：枯草芽孢杆菌表达系统  分泌表达 耐高温嗜热内切-1,4-β-木聚糖酶  

分 类 号：Q936]