文献类型：期刊文章

作　　者：何晓琳[1] 袁超[1] 屈雷[2] 陈玉林[1]

机构地区：[1]西北农林科技大学动物科技学院,杨凌712100 [2]榆林学院生命科学研究中心,榆林719000

出　　处：《畜牧兽医学报》

基　　金：国家重大转基因专项(2011ZX08008-002);国家自然科学基金(31101684);西北农林科技大学拔尖人才支持计划

年　　份：2013

卷　　号：44

期　　号：12

起止页码：1926-1931

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2013_2014、DOAJ、EMBASE、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：本研究旨在建立可稳定表达FGF5s的绒山羊胎儿成纤维细胞系。采用RT-PCR方法,从陕北白绒山羊皮肤组织cDNA中克隆FGF5s基因,构建PB转座子介导的真核表达载体PB-EGFP-FGF5s;在脂质体的介导下,将PB-EGFP-FGF5s载体和转座酶载体共转染绒山羊胎儿成纤维细胞,通过嘌呤霉素进行稳定筛选。并利用PCR和RT-PCR鉴定FGF5s基因在细胞基因组中的整合及表达情况。结果表明,成功克隆了陕北白绒山羊FGF5s基因并构建了PB-EGFP-FGF5s真核表达载体;PCR结果显示,FGF5s已整合到细胞基因组中;RT-PCR结果表明,该基因在转录水平上表达。另外,转染试验表明PB转座子可在绒山羊胎儿成纤维细胞中发生高效转座。本研究为制备绒山羊转基因细胞系提供了一种高效的方法,并为下一步通过核移植方法获得转基因绒山羊奠定了基础。

关 键 词：陕北白绒山羊 FGF5s  PIGGYBAC转座子 稳定转染

分 类 号：S827] S814.8]