文献类型：期刊文章

作　　者：邓杰[1] 张珂[1] 袁涛[1] 李春阳[1]

机构地区：[1]成都生物制品研究所有限责任公司科研开发部,四川成都610023

出　　处：《中国生物制品学杂志》

基　　金：国家国际科技合作项目(2010DFB33450)

年　　份：2013

卷　　号：26

期　　号：12

起止页码：1835-1839

语　　种：中文

收录情况：AJ、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2013_2014、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的 建立检测白喉毒素突变体CRM197细菌内毒素（bacterial endotoxin）含量的动态显色法（kinetic chromo-genic assay,KCA）。方法 按照《中国药典》三部（2010版）要求,用细菌内毒素检查用水（bacterial endotoxin,BET）稀释细菌内毒素工作标准品制备细菌内毒素标准曲线系列溶液,各浓度均设3个平行孔,分别与动态显色鲎试剂（kinetic chromogenic analysis tachypleus amebocyte lysate,KCA TAL）反应,绘制标准曲线,验证标准曲线的可靠性,确定最佳线性范围、测定范围及最低检测限（limit of quantitation,LOQ）,验证方法的精密性和准确性,并进行初步应用。结果 标准曲线的回归方程为：y=-0.263x＋2.741,R2=0.997,相关系数的绝对值∣r∣逸0.980,阴性对照的反应时间大于标准曲线最低点的反应时间,各复孔的变异系数（CV）约10%;内毒素浓度在0.02～2.50 EU/ml时,线性关系良好,LOQ为0.02 EU/ml;3个浓度（2.50、0.50、0.02 EU/ml）标准内毒素检测结果的CV均〈5%,加入高、中、低3个浓度（2.50、0.50、0.02 EU/ml）标准内毒素的3批供试品检测结果的CV均〈10%,回收率在95%～143%之间;采用建立的方法检测10批次CRM197样品的细菌内毒素含量,回收率在77%～118%之间,其中8批样品的内毒素含量合格。结论 动态显色法检测CRM197中内毒素的含量精密性和准确性良好,能快速、定量检测样品中的内毒素含量,抗干扰能力强,可用于CRM197研制过程中的质量控制。

关 键 词：动态显色法  细菌内毒素 CRM197  

分 类 号：R392-33]