文献类型：期刊文章

作　　者：孙婧陶[1] 李兆华[2] 张宝修[1] 茹李波[1] 李钟淑[1] 方南洙[1]

机构地区：[1]延边大学农学院/动物遗传育种与繁殖实验室,吉林延吉133002 [2]吉林省农业科学院,吉林长春130033

出　　处：《江苏农业科学》

基　　金：国家自然科学基金(编号:3136546);吉林省科技厅重点项目(编号:20100228)

年　　份：2013

卷　　号：41

期　　号：10

起止页码：149-152

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为了建立过氧化氢诱导延边奶山羊乳腺上皮细胞(DGMECs)氧化损伤模型,用体外培养的延边奶山羊乳腺上皮细胞传代后进行试验,用DMEM/F12培养基将H2O2稀释为5、50、100、200、500μmol/L,以DMEM/F12培养基作为空白对照组。以H2O2处理4 h后,用MTT法观察H2O2对乳腺上皮细胞活力的影响,用Hoechst33342/PI荧光染色法观察H2O2损伤对乳腺上皮细胞的促凋亡情况,DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)含量。MTT活性检测结果表明,各处理组的细胞存活率与未处理组差异显著(P<0.05)。5、50、100μmol/L H2O2作用4 h后,细胞存活率分别为91.21、77.50%、54.48%;而200、500μmol/L H2O2作用4 h后,细胞存活率仅为35.53%、27.79%,乳腺上皮细胞死亡过多。Hoechst33342/PI染色结果表明,H2O2通过诱导乳腺上皮细胞的凋亡及坏死来降低细胞的存活率。利用荧光探针DCFH-DA分析DGMECs的ROS水平,结果显示,细胞经H2O2处理后会明显增加细胞内ROS水平。H2O2100μmol/L处理细胞4 h后,约导致50%的细胞死亡,坏死比例小,ROS含量也相对较少,在此浓度下,细胞还具有恢复其功能的可能性,因此选用100μmol/L H2O2处理细胞4 h来建立延边奶山羊乳腺上皮细胞氧化损伤模型。

关 键 词：延边奶山羊  H2O2 乳腺上皮细胞 氧化损伤  凋亡

分 类 号：S852.2]