文献类型：期刊文章

作　　者：程浩[1] 张延芳[1] 许巍[2]

机构地区：[1]广东医学院信息工程学院物理教研室,广东省东莞市523808 [2]广西梧州制药(集团)股份有限公司,广西壮族自治区梧州市543002

出　　处：《中国组织工程研究》

基　　金：东莞市医疗卫生重点课题(2012105102006);东莞市医疗卫生一般课题(201210515200001)~~

年　　份：2013

卷　　号：17

期　　号：41

起止页码：7199-7204

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2013_2014、EMBASE、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：背景:组织工程需要大量的种子细胞,成骨细胞是骨组织工程的重要种子细胞之一。但是成骨细胞培养难度大,不同培养方法得到的成骨细胞数量、纯度、增殖及分化活性各有区别。目的:验证及比较成骨细胞原代培养常用的3种方法,探索一种操作简便,既经济又高效的原代培养成骨细胞的方法,为进一步的实验研究奠定基础。方法:取新出生72 h内SD大鼠乳鼠颅骨,以胶原酶消化法、分段胶原酶消化法及组织块法分离成骨细胞,进行细胞形态观察、细胞化学染色、CCK-8法绘制生长曲线及锥虫蓝排斥法计数活细胞率。结果与结论:分离培养的成骨细胞增殖良好,具备典型成骨细胞特性,细胞化学染色结果明显。胶原酶消化法比分段胶原酶消化法提取的成骨细胞数量多,细胞存活率高(P<0.05);且比分段胶原酶消化法操作简单,耗时短。组织块法操作最为简单,对细胞损伤较小,但是细胞数量低、耗时长,很难用于大规模成骨细胞培养。胶原酶消化法是一种方便、高效、理想的原代成骨细胞分离培养方法。

关 键 词：组织构建  骨组织构建 成骨细胞 原代培养 胶原酶消化法 组织块法 胶原酶 成骨细胞鉴定  

分 类 号：R318[生物医学工程类]