文献类型：期刊文章

作　　者：郝大利[1,2] 诸葛斌[1,2] 方慧英[1,2] 张成[1,2] 宗红[1,2] 诸葛健[1,2]

机构地区：[1]江南大学工业生物技术教育部重点实验室,无锡214122 [2]江南大学生物工程学院工业微生物研究中心,无锡214122

出　　处：《应用与环境生物学报》

基　　金：国家高技术研究发展计划("863"计划;2012AA021201)资助~~

年　　份：2013

卷　　号：19

期　　号：5

起止页码：817-821

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2013_2014、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为了提高大肠杆菌生产色氨酸的产量,以大肠杆菌中aroG基因编码的3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶(DAHPS)与trpBA基因编码的色氨酸合成酶(TSase)两个关键酶为研究对象,利用SOE-PCR方法对aroG基因进行632位碱基定点突变,获得抗反馈抑制的定点突变aroGf br基因,并与扩增获得trpBA基因串联于pEtac表达载体上共表达,获得重组菌Escherichia coli JM109/pEtac-aroGfbr-tac-trpBA,同时构建对照菌株E.coli JM109/pEtac-aroG-tac-trpBA.两种串联表达质粒重组菌的DAHPS酶活性,分别比含空载体出发菌株相应酶的活性提高4.3倍和3.8倍,突变DAHPS酶活提高1.13倍.摇瓶发酵表明,所构建的两菌株与出发菌株色氨酸产量相比较,分别提高8.23倍和11.47倍,带突变aroGf br基因的菌株比对照菌株色氨酸产量提高1.4倍,色氨酸产量明显提高,说明突变菌株能有效解除苯丙氨酸的反馈抑制作用.

关 键 词：色氨酸 大肠杆菌 aroG基因  trpBA基因  基因定点突变

分 类 号：Q786]