文献类型：期刊文章

作　　者：谷万港[1] 张丽[2] 张旋[3]

机构地区：[1]遵义医学院基础医学院免疫学教研室,贵州遵义563000 [2]昆明医科大学学报编辑部 [3]昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室,云南昆明650500

出　　处：《昆明医科大学学报》

年　　份：2013

卷　　号：34

期　　号：9

起止页码：42-45

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的构建重组基因表达载体pcDNA6/V5-HisA-IN并观察其在Hela细胞中的表达.对HIV-1整合酶表达以后在细胞里的定位情况进行研究.方法通过PCR扩增和定向克隆技术构建重组真核表达载体pcDNA6/V5-HisA-IN.以Lipofectamine2000介导转染Hela细胞.细胞用4%的多聚甲醛固定以后,经过PI对细胞核染色,整合酶抗体跟整合酶反应以后,用FITC标记的二抗进行孵育,用共聚焦显微镜观测整合酶在细胞中的表达情况.结果经过定向克隆和测序鉴定证实,重组真核表达载体pcDNA6/V5-HisA-IN构建成功.免疫荧光实验显示,Lipofectamine2000介导质粒转染Hela表达成功,整合酶主要定位在细胞核.结论 HIV-1整合酶真核表达载体构建成功,转染以后,整合酶表达并且主要定位在细胞核.

关 键 词：HIV-1 整合酶 细胞核 FITC

分 类 号：Q939.4]