文献类型：期刊文章

作　　者：陈霖祥[1,2] 蔡颖[2] 周广彪[2] 林昆[1]

机构地区：[1]汕头大学医学院公共卫生与预防医学教研室 [2]汕头出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东汕头515041

出　　处：《汕头大学医学院学报》

基　　金：广东省汕头市科技计划资助项目(汕市财文[2009]387号-126);广东省出入境检验检疫局科技计划资助项目(2012GDK45)

年　　份：2013

卷　　号：26

期　　号：3

起止页码：144-147

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：目的：优化荧光PCR-16SrDNA测序法鉴定金黄色葡萄球菌的FTA卡DNA模板制备的条件。方法：以金黄色葡萄球菌菌株为样品，将不同浓度菌液滴在FTA卡上，并用打孔器打出不同直径卡片，分别进行荧光PCR-16SrDNA测序，根据荧光PCR的Cp值和测序结果优化最合适的FTA卡制备DNA模板条件。结果：采用直接扩增法进行SYBRGreen荧光PCR反应时，在直径为0．5、1．0和2．0mm的卡片中，只有0．5mm的卡片获得扩增产物。6．0x10^4-7cfu／mL菌液制备的FTA样品卡，SYBRGreen荧光PeR扩增的cp值在14．8-28．2范围内，其测序产物数据较为理想。结论：6．0x10^4-7cfu／mL菌液制成的VIA样品卡，打出直径为0．5mm卡片，适于荧光PCR-16SrRNA测序法鉴定金黄色葡萄球菌。

关 键 词：FTA卡  细菌鉴定 DNA测序 荧光PCR 优化  

分 类 号：R372]