文献类型：期刊文章

作　　者：杨靖[1,2] 潘兴[1,3] 欧琴[2] 周法庭[1,3] 李建春[3] 祝捷[3] 周永君[3] 李明远[1] 王保宁[1]

机构地区：[1]四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室,成都610041 [2]湖北医药学院微生物学教研室,十堰442000 [3]四川万可泰生物技术有限责任公司,成都610041

出　　处：《成都医学院学报》

基　　金：湖北省教育厅科学研究计划项目(B2013115);湖北医药学院研究生启动基金资助计划项目(2012S08)

年　　份：2013

卷　　号：8

期　　号：4

起止页码：410-414

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSA、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的构建含幽门螺杆菌尿素酶保守基因序列ureI和ureB的双基因(简称IB)多表位原核表达质粒以及原核表达工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选T细胞和B细胞优势表位基因序列,人工合成所选择的表位基因序列并构建原核重组表达质粒pET28a(+)/IB。经限制性内切酶(EcoR I,Xho I)鉴定及DNA测序鉴定后,将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)。该工程菌经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测重组蛋白(rIB)的表达情况,用Western blot检测rIB的免疫反应性。结果构建的双基因多表位基因序列与所设计的一致;工程菌经IPTG诱导后做SDS-PAGE电泳显示,在28kD左右有一条明显蛋白条带,Western blot结果显示在28kD左右出现特异反应条带。结论成功构建含ureI和ureB双基因序列的原核表达质粒pET28a(+)/IB及工程菌,该工程菌表达的重组蛋白rIB能被抗幽门螺杆菌悉尼株(H.pylori SS1)的特异抗体所识别,表明该新重组蛋白与幽门螺杆菌有高度相关性。

关 键 词：幽门螺杆菌 双基因  多表位 原核表达

分 类 号：R378] R392[基础医学类]