文献类型：期刊文章

作　　者：曲政[1] 张世龙[1] 袁杰[1] 高玉光[2]

机构地区：[1]潍坊医学院口腔医学研究所,山东潍坊261053 [2]滨州医学院口腔医学院

出　　处：《潍坊医学院学报》

基　　金：国家自然科学基金(30973327);山东省自然科学基金(ZR2010HM076)

年　　份：2013

卷　　号：35

期　　号：4

起止页码：282-284

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：目的通过进行甲状旁腺素l受体(PTH1R)基因克隆以及真核表达载体的构建,分析PTH1R对成釉细胞MMP-20基因表达的影响.为进一步探讨PTH1R在牙釉质形成以及发育过程中的分子调控方面奠定基础。方法根据引物设计原则设计PTH1R基因的RT-PCR引物,用PCR法扩增得出含有EcoRⅠ和XhoL的PTH1R目的基因片段。通过T4连接酶连接到pcDNA3.1/myc-HisA真核表达载体上。并用双荧光素酶报告基因系统检测MMP-20启动子区域的转录活性。结果①经过PCR引物扩增得到1794BP的基因片段,将获得的重组质粒pcDNA3.1/myc-HisA-PTH1R双酶切分析鉴定,测序结果与GenBank登录基因完全一致。②经双荧光素酶报告基因系统检测得出PTH1R能够上调MMP-20基因的表达水平。结论成功实现了PTH1R基因克隆及真核表达载体的构建,初步证明了PTH1R可能调控MMP-20基因的表达。

关 键 词：甲状旁腺素1受体  基因克隆  载体构建  RT-PCR

分 类 号：R329]