文献类型：期刊文章

作　　者：赵巍[1] 苏川[2] 吴海玮[2] 胡雪梅[2] 沈蕾[2] 王荣芝[2] 马磊[2] 陈淑贞[2] 张兆松[2]

机构地区：[1]宁夏医学院生物学教研室,访问学者银川750004 [2]南京医科大学医学分子生物学研究所

出　　处：《中国血吸虫病防治杂志》

基　　金：江苏省医学分子生物学重点实验室开放课题

年　　份：2000

卷　　号：12

期　　号：5

起止页码：261-264

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、SCOPUS、ZGKJHX、ZR、普通刊

摘　　要：目的　构建基因工程菌株 ,获得重组蛋白 Sj- FABPc(日本血吸虫脂肪酸结合蛋白 )。方法　用 PCR法从日本血吸虫 c DNA文库中扩增 Sj- FABPc基因片段 ,再将该片段重组于 p GEM- T中并进行 DNA测序鉴定 ,经酶切后将目的片段构建成重组质粒 p GEX- 6 P- 1/ Sj- FABPc,转化于大肠杆菌 BL2 1 ,IPTG诱导表达。用 Glutathione Sepharose TM 4B亲和层析柱对表达产物进行纯化 ,Pre Scission TMProtease酶对融合蛋白进行解离 ,获得纯化的 14k Da Sj- FABPc。SDS- PAGE和 West-ern Blot方法对表达产物进行鉴定。结果　获得 p GEX- 6 P- 1/ Sj- FABPc菌株 ,分离纯化出 14k Da Sj-FABPc,表达量为 10 .5 2 m g/ L。Western Blot显示 ,表达蛋白能被日本血吸虫免疫兔血清识别。结论　重组蛋白 Sj- FABPc可高效表达并有良好的抗原性。

关 键 词：日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 基因克隆 重组抗原

分 类 号：R383.24] Q784[基础医学类]