文献类型：期刊文章

作　　者：孙伟[1] 李群[1] 冯金荣[1] 庄重[1] 朱丹丹[1] 段义农[1]

机构地区：[1]南通大学医学院病原生物学系,226001

出　　处：《免疫学杂志》

基　　金：江苏省高校自然科学基金(11KJB310008);南通市科技计划项目(K2010035);南通大学自然科学预研项目(10ZY009)

年　　份：2013

卷　　号：29

期　　号：9

起止页码：792-795

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2013_2014、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的对白介素-32(interleukin-32,IL-32)的不同剪接异构体进行克隆及表达。方法设计保守引物,以Jurkat细胞的cDNA为模板进行PCR扩增,克隆IL-32不同剪接异构体;DNA测序扩增产物,计算机辅助分析IL-32基因序列特征;构建IL-32原核及真核表达重组质粒,并利用SDS-PAGE和Western blot检测其表达情况。结果克隆得到已知的IL-32的6个剪接异构体(α、β、γ、δ、ε、ζ),还克隆得到1个新的IL-32剪接异构体,将其命名为IL-32η,Genbank登录号JN546102。IL-32η编码区长度为336 bp,编码的蛋白含111个氨基酸残基,其理论相对分子质量为12 560。IL-32η原核表达产物主要以可溶形式位于宿主菌的周质腔。亲和纯化了重组IL-32η,利用重组IL-32η制备了兔多克隆抗体,该抗体能够识别IL-32全部的7个剪接异构体。结论克隆得到1个新的IL-32剪接异构体IL-32η,它的发现将为全面理解IL-32的功能提供新思路。

关 键 词：白介素-32  剪接异构体 原核表达 真核表达

分 类 号：R346[基础医学类]