文献类型：期刊文章

作　　者：于华实[1] 孙晓琳[1] 张天竹[1] 李梅[1] 李淑珍[1] 唐晓波[1]

机构地区：[1]哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室,黑龙江哈尔滨150081

出　　处：《现代生物医学进展》

基　　金：哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(2008RFXXS018)

年　　份：2013

卷　　号：13

期　　号：18

起止页码：3420-3423

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、IC、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:重组人鳞状细胞癌抗原(SCCA)的基因及表达融合蛋白,为下一步建立新的肝癌诊断方法奠定基础。方法:提取子宫颈癌细胞株(hela)中的总RNA,应用RT-PCR、PCR等技术扩增出SCCA基因,将其分别与PET-32a及PGEX-4T-1载体连接,转化入DH5α菌中进行克隆,并测序鉴定。异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导转入工程质粒的BL21菌中表达SCCA融合蛋白(分别含有HIS,GST-Tag),并进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果:经RT-PCR、PCR扩增后成功获得一条450 bp的DNA片段,经测序鉴定与预期序列一致;并成功在大肠杆菌中实现了高表达,经Western blotting鉴定为SCCA融合蛋白。结论:成功获得SCCA目的基因并获得高纯度的SCCA融合蛋白,为进一步开发针对肝癌的SCCA诊断试剂打下基础,开辟诊断肝癌新途径。

关 键 词：肝癌 SCCA基因  克隆 表达  

分 类 号：Q78] R735.7]