文献类型：期刊文章

作　　者：罗小林[1,2] 钟华[1,2] 梁霄[1,2] 王振焕[1,2] 龚艳[1,2] 邓峰美[1,2] 孙志萍[3] 何芳[1,2]

机构地区：[1]新疆石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室,新疆石河子市832002 [2]新疆石河子大学医学院病理生理教研室,新疆石河子市832002 [3]新疆石河子大学医学院医学机能实验中心,新疆石河子市832002

出　　处：《中国动脉硬化杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30860099)

年　　份：2013

卷　　号：21

期　　号：6

起止页码：486-492

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD_E2013_2014、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨小凹蛋白1(Cav-1)上调人脐静脉内皮细胞钙敏感受体介导内皮型一氧化氮合酶(eNOS)激活的作用机制。方法培养人脐静脉内皮细胞,取同代细胞随机分为:(1)对照组;(2)钙敏感受体激动剂精胺(2.0 mmol/L)+Ca2+组;(3)Caveolae结构破坏剂(Filipin,1.5 mg/L)+精胺+Ca2+组;(4)Cav-1 ShRNA+精胺+Ca2+组;(5)空质粒+精胺+Ca2+组;(6)Filipin不同浓度(1.5、2.0、2.5 mg/L)组。免疫印迹检测人脐静脉内皮细胞中eNOS和磷酸化eNOS(p-eNOS)、Cav-1以及eNOS膜蛋白表达;免疫荧光和免疫共沉淀技术检测Cav-1和eNOS表达、共定位以及相互作用。结果不同浓度Filipin不影响eNOS和p-eNOS蛋白表达(P>0.05);精胺作用下细胞内p-eNOS表达增加(P<0.05),此作用可被Filipin(1.5 mg/L)或Cav-1基因沉默完全阻断(P<0.05);Fili-pin(1.5 mg/L)或Cav-1干扰处理后,eNOS的膜蛋白表达减少(P<0.05),eNOS的蛋白表达无变化(P>0.05);免疫荧光双标显示Filipin(1.5 mg/L)或Cav-1基因沉默后eNOS在小凹定位减少,核周边局部区域聚集增多。与对照组和精胺+Ca2+组比较,Cav-1 ShRNA处理组Cav-1和eNOS相互作用减弱(P<0.05),其他处理组间的相互作用无统计学意义(P>0.05)。结论人脐静脉内皮细胞中Cav-1上调钙敏感受体介导eNOS激活作用机制可能与Cav-1影响eNOS质膜定位及抑制eNOS向细胞器转位有关。

关 键 词：小凹蛋白1 内皮型一氧化氮合酶 钙敏感受体 人脐静脉内皮细胞

分 类 号：R363]