文献类型：期刊文章

作　　者：邓小昭[1] 朱应[2] 刁振宇[1] 齐义鹏[2] 周宗安[1]

机构地区：[1]南京军区军事医学研究所分子生物学实验室,南京210002 [2]武汉大学病毒研究所,武汉430073

出　　处：《微生物学报》

基　　金：江苏省自然科学基金课题! (BK95 1 40 30 6 )

年　　份：2000

卷　　号：40

期　　号：2

起止页码：155-160

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX1996、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PUBMED、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：用家蚕核型多角体病毒的全基因组DNA与AcBacmidDNA共转染家蚕BmN细胞,构建转座一穿梭载体BmBacmid。另一供体质粒以转座方式将乙肝病毒e抗原基因HBeAg整合到BmBacmid的attTn7位点上成为重组rBmHBe。结果表明BmBacmid既能在大肠杆菌中以质粒的形式复制,又能在家蚕BmN细胞和草地夜蛾Sf9细胞中复制,形成感染性病毒粒子。Southernblotting证实重组病毒的构建是正确的。BmN细胞能正确识别与切割HBeAg信号肽序列,SDSPAGE表明HBeAg基因在家蚕细胞中高效表达,ELISA测定培养上清中HBeAg效价达1∶32000,细胞内HBeAg效价为1∶2000,培养液及细胞内的HBcAg含量极低(〈1∶160)。

关 键 词：BMNPV BAC to  Bac策略  表达系统  HBCAG

分 类 号：S884.5]