文献类型：期刊文章

作　　者：史喜菊[1] 马贵平[1] 乔彩霞[1] 郭志红[2] 张伟[1] 刘全国[1] 李炎鑫[1] 李冰玲[1]

机构地区：[1]北京出入境检验检疫局,北京100026 [2]北京市兽药监察所,北京100012

出　　处：《农业生物技术学报》

基　　金：国家质量监督检验检疫总局课题(No.2011IK001)

年　　份：2013

卷　　号：21

期　　号：6

起止页码：745-752

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2013_2014、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：现有的动物疫病诊断技术多是针对单一病原进行的，而动物疫病的流行却出现了多种病毒混合感染，现有诊断技术不能很好地满足国境口岸快速、高通量检疫的需求，动物疫病多重检测新技术的研究近来己经成为动物疫情监测、疫病控制领域关注的焦点。本研究利用多重连接探针扩增（MLPA）技术特异、敏感、高通量等技术优势，以猪流感病毒（SIV）、伪狂犬病病毒（PRV）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪传染性胃肠炎（TGEV）和猪繁殖与呼吸综合症病毒（PRRSV）为研究对象，分别设计了这5种病毒的MLPA探针，将这5种探针混合，建立了可以同时检测这5种病毒的MLPA扩增方法。方法特异性试验表明，针对每种病毒的探针都只能扩增出其对应的病毒模板，其余病毒模板的扩增都是阴性结果；而且，5种探针混合物都只能从单个目的病毒中扩增出单一的特异性条带，而猪细小病毒（PPV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪流行性腹泻病毒fPEDVl的扩增均为阴性。敏感性试验结果表明，5重MLPA扩增的最低检测限可以达到单个病毒核酸3000～6000个拷贝。本研究建立的5种病毒MLPA检测方法在国内外首次实现一次采样，一次分析，检测5种猪病的目的，该技术特异性强，敏感性高，加之其多重性检测优势，有望成为未来疫病检测的新方向。

关 键 词：多重连接探针扩增(MLPA)技术  5种病毒  同时检测  

分 类 号：S852.659.5]