文献类型：期刊文章

作　　者：肖莉[1] 张蕾[1,2] 牟卉[3] 李荣贵[1]

机构地区：[1]青岛大学生物系,山东青岛266071 [2]青岛奥克生物开发有限公司,山东青岛266000 [3]华中农业大学动物医学院,湖北武汉430070

出　　处：《青岛大学学报（工程技术版）》

基　　金：国家自然科学基金(31070575);山东省自然科学基金(ZR2010CM009);青岛市科技发展计划项目(12-1-4-2-(1)-jch)

年　　份：2013

卷　　号：28

期　　号：2

起止页码：65-69

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：针对松萎蔫病的早期诊断及生物防治,本文利用PCR技术从荧光假单胞菌GcM5-1A的基因组中克隆了鞭毛蛋白编码基因fliC,再将该基因克隆到表达载体pET-15b的NcoI和XhoI位点,构建重组质粒pET-15b-fliC,再将重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3),构建工程菌,IPTG诱导工程菌高效表达C-末端具有多聚组氨酸标签的重组鞭毛蛋白,重组蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经8mol/L尿素溶解,复性并经Ni2+螯合柱亲和层析得到了电泳纯的重组鞭毛蛋白。生测结果表明,重组鞭毛蛋白可引起黑松细胞的大量死亡,与天然鞭毛蛋白对黑松愈伤组织细胞有相似的毒性。该研究为松萎蔫病致病机理的研究奠定了基础。

关 键 词：荧光假单胞菌 鞭毛蛋白 克隆  表达  黑松细胞  

分 类 号：S763.7]