文献类型：期刊文章

作　　者：成永强[1] 贾海莲[1] 唐志远[1] 赵晶晶[1] 李正平[1]

机构地区：[1]河北大学化学与环境科学学院,药物化学与分子诊断省部共建教育部重点实验室,河北保定071002

出　　处：《河北大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(21075028);高等学校博士点基金资助项目(20091301120003);河北省自然科学基金资助项目(B2012201078)

年　　份：2013

卷　　号：33

期　　号：3

起止页码：258-263

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、CAS、CSA、MR、RCCSE、RSC、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：结合恒温滚环扩增(rolling circle amlification,RCA)、单链特异性核酸外切酶Ⅰ(exonucleaseⅠ,ExoⅠ)和阳离子共轭聚合物(Cationic conjugated polymer,CCP)荧光共振能量转移(fluorescence reso-nance energy transfer,FRET)技术,建立了一种特异、灵敏的均相检测microRNA(miRNA)的新方法.该方法应用荧光标记探针与RCA扩增的长链DNA产物杂交,当加入CCP时,其与杂交的标记探针通过静电力结合,发生高效的FRET.未杂交的标记探针利用ExoⅠ水解成单核苷酸,其与CCP相互作用力弱,不能发生有效的FRET.基于此,无需分离和洗涤步骤,实现了RCA扩增miRNA的均相检测.方法特异性好,灵敏度高,线性为0.5～20pmol/L,检出限为0.2pmol/L.方法为miRNA均相检测和原位成像分析以及临床诊断提供了新策略.

关 键 词：分析化学 MICRORNA 滚环扩增 阳离子共轭聚合物  荧光共振能量转移(FRET)  

分 类 号：O657.34]