文献类型：期刊文章

作　　者：周伟玲[1] 杨帆[1] 祖勉[1] 李超[1] 刘艾林[1,2,3] 杜冠华[1,2,3]

机构地区：[1]中国医学科学院北京协和医学院药物研究所国家药物筛选中心 [2]药物靶点研究与新药筛选北京市重点实验室 [3]天然药物活性物质与功能国家重点实验室,北京100050

出　　处：《中国新药杂志》

基　　金：国家"重大新药创制"科技重大专项(2012ZX09301002);北京市自然基金(103172)

年　　份：2013

卷　　号：22

期　　号：10

起止页码：1137-1142

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD_E2013_2014、EMBASE、IC、IPA、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:建立适于高通量筛选的流感病毒核酸内切酶(PAN)抑制剂筛选模型。方法:在大肠杆菌中诱导表达质粒,经蛋白纯化和浓缩,得到目的蛋白PAN。提取噬菌体M13K07的单链环状DNA为底物,应用荧光定量方法建立PAN抑制剂高通量筛选体系,并对应用虚拟筛选技术挑选的100个样品进行PAN抑制活性筛选。结果:反应体系在底物质量浓度0.2μg.mL-1,pH 9.0,Mn2+浓度1 mmol.L-1,37℃温孵60 min的条件下酶活性最佳。此时Z'因子为0.77,可用于高通量筛选。筛选结果发现7个样品对PAN具有抑制活性。结论:本研究建立的流感病毒核酸内切酶抑制剂高通量筛选体系可用于PAN抑制剂的筛选。

关 键 词：流感病毒 PAN.内切酶抑制剂  荧光定量方法  高通量筛选

分 类 号：R965.1]