文献类型：期刊文章

作　　者：赵林[1,2] 吴梅芝[1] 陈展歌[1] 李黄金[1] 周联[2]

机构地区：[1]广东药学院生命科学与生物制药学院生物技术系,广东广州510006 [2]广州中医药大学临床药理研究所免疫研究室,广东广州510460

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81273423);广东省科技计划项目(2011B080701004)

年　　份：2013

卷　　号：29

期　　号：6

起止页码：647-651

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328并分析其免疫原性。方法采用重叠延伸PCR来扩增P64k-EGFR262-328融合基因,克隆至pMD18-T,经测序鉴定后与pET-21b构建重组表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。目的蛋白经IPTG诱导表达后用Source Q阴离子层析和Ni-NTA亲和层析纯化,纯化的融合蛋白乳化后免疫BALB/c小鼠分析其免疫原性。结果获得了2 031 bp的融合基因,IPTG诱导后获得了相对分子质量(Mr)70 000大小的目的蛋白,经两步柱层析后,融合蛋白达到了95%以上的纯度,并在小鼠体内产生了高达1∶16 000以上的抗体滴度。结论成功制备了肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328。

关 键 词：EGFR 二聚化界面  肿瘤疫苗 P64k  免疫原性

分 类 号：R392.11]