文献类型：期刊文章

作　　者：田瑞敏[1] 鄢佳程[2] 易芳[2] 王含彦[2] 宋永燕[2] 唐华英[1] 陈建业[1,2]

机构地区：[1]川北医学院应用技术研究所 [2]川北医学院生物化学教研室,四川南充637000

出　　处：《川北医学院学报》

基　　金：四川省教育厅重点项目(07ZA029)

年　　份：2013

卷　　号：28

期　　号：2

起止页码：112-116

语　　种：中文

收录情况：CAS、IC、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:构建21.5 kD MBP基因干扰序列21.5 kD MBP-shRNA(21.5 kD MBP short hairpin RNA interference),筛选最佳沉默效果的21.5 kD MBP-shRNA真核表达载体,为21.5 kD MBP基因功能研究提供实验材料。方法:将21.5 kD MBP-shRNA阳性真核表达载体和阴性真核表达载体经脂质体介导分别转入人神经胶质瘤细胞株U251中,观察转染24 h后的转染效率;提取各组细胞总RNA,用实时荧光定量PCR技术检测各组21.5 kD MBP基因在mRNA水平的表达差异性。结果:21.5kD MBP-shRNA真核表达重组载体被成功转染入U251细胞,与阴性对照质粒(pGenesil-1-MBP-neg)转染组相比,沉默质粒转染组(pGenesil-1-MBP-1、pGenesil-1-MBP-2、pGenesil-1-MBP-3质粒分别转染)细胞中21.5 kD MBP mRNA表过水平均显著下降(P<0.05),其中pGenesil-1-MBP-3转染组细胞中21.5 kD MBP mRNA表达水平最低。结论:成功筛选出最佳沉默效果的21.5 kD MBP-shRNA真核表达载体,为21.5 kD MBP基因功能研究及基因治疗研究奠定了实验基础。

关 键 词：髓鞘碱性蛋白 21  5kD  MBP-shRNA表达载体  基因干扰

分 类 号：R966]