文献类型：期刊文章

作　　者：孔宝华[1] 陈海如[1] 常胜军[2] 朱水芳[3] 黄文胜[3] 刘进元[2]

机构地区：[1]云南省植物病理重点实验室,昆明650201 [2]清华大学生命科学与工程研究院 [3]农业部植物检疫实验所

出　　处：《植物检疫》

基　　金：云南省院省校合作基金项目

年　　份：2000

卷　　号：14

期　　号：5

起止页码：257-260

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX1996、CAB、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为了从植物组织中快速检测李坏死环斑病毒 (PNRSV) ,根据该病毒RNA 3序列设计引物 ,对感病和健康组织总RNA进行RT PCR ,结果从感病组织中扩增出了大约 45 0bp的目的片段 ,而健康组织中无此扩增带。将此PCR产物连接到 pGEM T easy载体 ,转化大肠杆菌DH5 5α菌株 ,得到了含有目的片段的重组子 ,并采用双脱氧终止法进行序列分析 ,结果与美国报道的李坏死环斑病毒RNA3序列对应部分核苷酸基本一致 (其同源性达 93.6 %) ,这表明应用RT PCR来检测李坏死环斑病毒是可行的 ;PCR产物克隆作为RT PCR反应的阳性对照解决了检疫对象不能扩散的问题 ,从而建立了RT

关 键 词：李坏死环斑病毒 RT-PCR 品岸植物检疫  

分 类 号：Q939.4]