文献类型：期刊文章

作　　者：唐超[1] 任恋[1] 刘宪楚[1] 李容[1] 江志钢[1] 赵阳[1] 廖四芳[1] 袁佳佳[1] 莫小阳[1] 吴秀山[1]

机构地区：[1]湖南师范大学生命科学学院,蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,中国湖南长沙410081

出　　处：《生命科学研究》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30930054)

年　　份：2013

卷　　号：17

期　　号：2

起止页码：116-119

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2013_2014、JST、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：在果蝇(Drosophila melanogaster)的研究中发现Domeless接受器参与发育期间的JAK/STAT信号调节,在心脏疾病的发生机制中发挥重要作用.为了克隆Domeless,我们利用生物信息学选择果蝇Domeless基因抗原亲水区,将扩增出的PCR片段克隆到原核表达pET-28a载体中,转入E.coli(Escherichia coli)中后通过IPTG(Isopropylβ-D-thiogalactoside)诱导融合蛋白表达,Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,纯化后的His-Domeless融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.用Western blot检测抗体的效价和特异性.获得了Domeless原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗Domeless多克隆抗体,为后续Domeless功能研究奠定了基础.

关 键 词：Domeless  果蝇 原核表达 多克隆抗体

分 类 号：Q71]