文献类型：期刊文章

作　　者：吴艳芳[1,2] 郭林霞[1] 乐晓萍[1] 丁一[1]

机构地区：[1]郑州大学基础医学院组织学胚胎学教研室,郑州450001 [2]新乡医学院基础医学院人体解剖学实验室,河南新乡453003

出　　处：《解剖学报》

基　　金：河南省医学科技攻关计划资助项目(201003005)

年　　份：2013

卷　　号：44

期　　号：2

起止页码：219-223

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的探讨胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ(Reg Ⅰ)基因转录因子的效应。方法应用巢式PCR技术从胃癌细胞SGC7901基因组DNA扩增Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段,将该片段插入pMD19-T载体,序列分析鉴定。应用随机引物法以地高辛分别标记1414bp及其HindⅢ酶切800bp和614bp片段,经灵敏度检测后,作为探针。应用Genomatix MatInspector在线分析软件分析Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段的转录因子结合位点。分别以10-7mol/L和10-8mol/L胃泌素G-17处理胃癌细胞SGC7901 48h,提取核蛋白。应用DNA-蛋白质印迹法(Southernblotting),分别以地高辛标记的1414bp、800bp和614bp片段为探针检测胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因转录因子的效应。结果 1414bp探针可检测到20条蛋白主带。胃泌素孵育后,带型没有变化,但是一些条带的灰度值改变,带9、12、13、14、15和16的灰度值明显降低(P<0.05);不同浓度胃泌素处理组之间上述6个条带的灰度值差异不明显(P>0.05)。614bp探针可检测到灰度值变化的6条主带中的带9、12和13,胃泌素处理后,此3条主带的灰度值明显降低(P<0.05)。800bp探针可检测到灰度值变化的6条主带中的带9、12和14,胃泌素处理后,仅带14的灰度值明显降低(P<0.05)。614bp和800bp探针均未检出带15和带16。结论胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因表达由多个转录因子协同调控。降低几个转录因子的结合活性可能是胃泌素上调胃癌细胞SGC7901Reg Ⅰ基因表达的途径之一。

关 键 词：REG I基因  胃泌素 转录因子 胃癌细胞 DNA-蛋白质印迹法  

分 类 号：R735.2]