文献类型：期刊文章

作　　者：张晓钰[1] 左晓峰[1] 肖传英[1] 单龙[1] 茹炳根[1]

机构地区：[1]北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系,蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室,北京100871

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》

年　　份：2000

卷　　号：16

期　　号：5

起止页码：631-636

语　　种：中文

收录情况：CSCD、CSCD2011_2012、普通刊

摘　　要：金属硫蛋白是一类小分子量的金属结合蛋白 ,有 β,α两个结构域 .用另一个 α结构域取代金属硫蛋白的 β结构域 ,得到突变体 αα.通过 PCR法在 αα- c DNA翻译起始密码子 ATG前加入植物偏爱的碱基组合 AACA,构建 Ca MV双 35S启动子驱动的 αα- c DNA植物表达载体 p GPTVd35S-αα,此载体以抗除草剂基因 ( bar)作为选择标记物 .用根癌农杆菌介导的叶盘法对栽培种烟草 NC89进行转化 .Southern和 Western印迹分析表明突变体αα- c DNA已整合进入烟草基因组并且可以正常表达 .Northern印迹结果显示突变体αα- c DNA在烟草根部的表达强于叶部 .烟草根、茎、叶Cd2 +含量分析表明 ,转基因植物与对照相比 ,Cd2 +更多地集中在根部 ,在一定程度上降低了叶片中的 Cd2 + 含量 .Cd2 + 抗性实验进一步证明突变体αα- c DNA的表达提高了转基因烟草对 Cd2 + 的抗性 :转基因烟草在 2 0 0μmol/L Cd Cl2 条件下生长正常 ,在 40 0μmol/Cd Cl2 培养基内也可以存活 .而 1 0 0μmol/L Cd Cl2 即成为对照烟草的致死剂量 .

关 键 词：金属硫蛋白突变体αα  转基因烟草 土壤污染

分 类 号：X530.6] Q78]