文献类型：期刊文章

作　　者：赵蕊[1] 吕静野[1] 严启滔[1] 张宝[1] 郑文岭[2] 马文丽[1]

机构地区：[1]南方医科大学基因工程研究所,广东广州510515 [2]华南基因组研究中心,广东广州510800

出　　处：《基础医学与临床》

基　　金：国家青年科学基金(81000226);广东省医学科研基金(A2011360)

年　　份：2013

卷　　号：33

期　　号：4

起止页码：418-422

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CSCD、CSCD2013_2014、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建重组慢病毒载体TREAutoR3-CHD5,并检测其在结直肠癌细胞系LOVO中的表达。方法采用PCR扩增技术从CHD5 cDNA克隆中获得CHD5的全长读码框,将CHD5基因导入慢病毒载体TREAutoR3中,酶切,测序验证后,重组慢病毒载体TREAutoR3-CHD5与慢病毒包装质粒pCMV-VSV-G,pRSV-Rev,pMDLg-pRRE共转染293FT细胞,将包装重组慢病毒感染结直肠癌细胞系LOVO。通过荧光定量PCR和Western bolt验证CHD5基因在细胞中的转录和表达情况,应用MTT检测CHD5过表达对LOVO细胞增殖的影响。结果成功构建了慢病毒载体TREAutoR3-CHD5,荧光定量PCR结果显示慢病毒感染LOVO细胞能稳定转录CHD5基因,Western bolt显示感染后LOVO细胞稳定表达CHD5蛋白。感染后的LOVO细胞的增殖受到抑制。结论包装的慢病毒能够成功的感染LOVO细胞,并且CHD5能抑制结直肠癌细胞系LOVO的增殖。

关 键 词：CHD5  慢病毒载体 肿瘤

分 类 号：R735.3]