文献类型：期刊文章

作　　者：常莉[1,2] 李文辉[1,2] 汪宇辉[3] 刘延友[3] 江舟[3] 肖静[3] 郭慧玲[3] 王正荣[3]

机构地区：[1]云南省肿瘤医院 [2]昆明医科大学第三附属医院放疗中心,云南昆明650118 [3]四川大学华西基础医学与法医学院时间生物学卫生部重点实验室,四川成都610041

出　　处：《现代生物医学进展》

基　　金：国家自然科学基金项目(81101693);云南省科技厅-昆明医科大学联合专项(2011FB206)

年　　份：2013

卷　　号：13

期　　号：1

起止页码：14-18

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、IC、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:筛选出与PER1蛋白相互作用的LAMR1的核心位点。方法:采用盒式定点突变法,对重组目的质粒pGADT7-Rec/Lamr1201-295的插入片段Lamr1201-295羧基末端的205-216氨基酸序列RDPEEIEKEEQA进行定点突变,并以hPER1蛋白的bHLH-PAS结构域为诱饵蛋白,通过酵母双杂交系统确定这4种不同的突变LAMR1201-295片段与hPER1的相互作用。结果:营养缺陷培养基筛选显示4种转化菌在二缺SD/-Leu/-Trp、三缺SD/-His/-Leu/-Trp和四缺SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp固体培养基上都可以生长;β-半乳糖苷酶印膜法检测结果显示4种转化菌均可显色。结论:突变片段LAMR1-RDP,LAMR1-EEI,LAMR1-EKE和LAMR1-EQA都能够与hPER1的bHLH-PAS结构域在酵母中发生相互作用。提示LAMR1的205-216Aa可能不是其与hPER1相互作用的核心氨基酸序列。

关 键 词：PER1 LAMR1  相互作用 酵母双杂交 定点突变

分 类 号：R34[基础医学类] Q51]