文献类型：期刊文章

作　　者：杨金华[1] 秦瑞云[2] 付庆云[1] 邓传良[2]

机构地区：[1]河南科技学院高等职业技术学院,河南辉县453003 [2]河南师范大学生命科学学院,河南新乡453007

出　　处：《江苏农业科学》

基　　金：河南省教育厅自然科学基金(编号:2007180028);河南师范大学遗传学省级重点学科资助项目

年　　份：2013

卷　　号：41

期　　号：2

起止页码：36-38

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以菠菜雌雄成株的幼嫩叶片为材料,用改良2×CTAB法提取基因组DNA,研究影响菠菜ISSR-PCR的因素,分别对模板浓度、Mg2+浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度进行优化,建立了适用于菠菜ISSR-PCR的反应体系(25μL):模板用量为60 ng、引物浓度为0.4μmol/L、Mg2+浓度为2.0 mmol/L、dNTPs用量为0.2 mmol/L、Taq酶用量为0.5 U。扩增程序为95℃预变性5 min,94℃变性1 min,52℃退火1 min,72℃延伸2 min,循环35次,72℃延伸8 min。该体系以菠菜雌雄株进行扩增验证,得到的条带清晰、多态性高、重复性高,且在雌株中发现特异条带。

关 键 词：菠菜 ISSR-PCR 体系  优化  

分 类 号：Q344.2]