文献类型：期刊文章

作　　者：包林[1] 张黎[2] 曾晓燕[2] 郭喜玲[2] 史凤娟[2] 黄明明[3] 梁淑仪[1] 汪华[1] 焦永军[2]

机构地区：[1]南京医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系,江苏南京211166 [2]江苏省疾病预防控制中心病原微生物研究所,江苏南京210009 [3]南京农业大学动物医学系,江苏南京210095

出　　处：《南京医科大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家科技重大专项(2008ZX10002-001;2009ZX10004-904);江苏省医学重点人才项目(RC2011082)

年　　份：2013

卷　　号：33

期　　号：1

起止页码：37-41

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD_E2013_2014、IC、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)VP1外壳蛋白单克隆抗体。方法:利用重组纯化的EV71-VP1蛋白为抗原免疫BALB/c鼠,按常规杂交瘤技术进行细胞融合,对阳性杂交瘤细胞进行筛选及亚克隆,获得1株能稳定分泌抗EV71-VP1抗体的杂交瘤细胞株6F2B9,细胞体外扩大培养后的上清用Protein G柱纯化,超滤后用BCA法测其浓度,用免疫球蛋白亚类鉴定试剂盒鉴定单克隆抗体亚型,间接ELISA方法检测其效价和特异性,间接免疫荧光法检测其与EV71病毒的特异性结合能力。结果:本研究得到的抗EV71-VP1抗体DSE-136,纯化后浓度为1.9 g/L,免疫球蛋白亚类为IgG2b,轻链属于κ链;间接ELISA检测效价为1∶3.2×105;间接免疫荧光结果显示其可与EV71病毒特异性结合。结论:成功制备出1个效价高、特异性好的抗EV71-VP1单克隆抗体DSE-136,为VP1抗原诊断、疫苗研发及其效果评价奠定了基础。

关 键 词：肠道病毒71型 VP1蛋白 单克隆抗体

分 类 号：R392.11]