文献类型：期刊文章

作　　者：韩冰[1] 向阳[1] 冯凤芝[1] 万希润[1] 钱海利[2] 张雪燕[2] 孟希亭[2] 林晨[2]

机构地区：[1]中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院妇产科,100730 [2]肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室

出　　处：《中华妇产科杂志》

基　　金：国家自然科学基金（30973178）;国家教育部博士点基金（20101106110001）

年　　份：2013

卷　　号：48

期　　号：1

起止页码：41-45

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的比较氟尿苷（FUDR）耐药的绒毛膜癌（绒癌）细胞系JeG．3／FUDRA细胞和其亲本细胞系JeG一3细胞（FUDR敏感）之间表达差异的蛋白质，探讨其在绒癌耐药发生中的作用。方法采用双向差异凝胶电泳（2-DE）技术筛选JeG一3／FUDRA细胞和JeG．3细胞之间表达差异的蛋白质，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI—TOF—MS）技术鉴定差异表达的蛋白质。利用靶基因功能的显著性（GO）分析和途径（Pathway）分析方法对差异表达的蛋白质进行分析和筛选，筛选出目的蛋白质。蛋白印迹法验证JeG一3／FUDRA细胞中目的蛋白质的表达；小分子干扰RNA（siRNA）干扰JeG一3／FUDRA细胞中目的蛋白质的表达后，观察其耐药性的变化。结果2-DE技术检测显示，在JeG-3／FUDRA细胞和JeG-3细胞中共筛选出46个差异表达的蛋白质，并经MALDI—TOF．MS技术鉴定证实其均为差异表达的蛋白质点；通过GO分析和Pathway分析方法对差异表达的蛋白质进行分析和筛选后发现，内质网蛋白质折叠分子伴侣钙网蛋白（CALR）、蛋白二硫异构酶A3（PDIA3）和相对分子质量为78000的葡萄糖调节蛋白（GRP78）在耐药细胞中表达均明显增高。蛋白印迹法检测显示，JeG-3／FUDRA细胞中CALR、PDIA3、GRF78蛋白的表达强度明显高于JeG-3细胞。干扰JeG一3／FUDRA细胞中CALR和PDIA3基因的表达后，JeG-3／FUDRA细胞的耐药性分别下降了76．3％（干扰前后分别为36．7±2．0和8．7±3．1，P〈0．05）和51．4％（干扰前后分别为36．7±2．0和17．8±1．2，P〈0．05）。结论内质网蛋白质折叠分子伴侣CALR、PDIA3、GRP78很可能参与了绒癌细胞FUDR耐药的发生。

关 键 词：绒毛膜癌 细胞系,肿瘤  抗药性,肿瘤  蛋白质折叠 氟尿苷 蛋白质二硫化物异构酶  热休克蛋白质类  

分 类 号：R737.33]